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• 荧光定量PCR产生荧光的机制包括

  • A．双链DNA染料结合法陶威
  • B．荧光标记引物法闹疫翅间矿狸惨春迷
  • C．荧光辐射圈皱
  • D．荧光标记探针法减菌共茫路
  • E．荧光散射罢尿刻唱

• 荧光定量PCR可对起始模板数进行定量。
  提示：荧光定量PCR中最重要的定量参数是循环阈值（Ct），其含义为

  • A．PCR反应过程中荧光信号由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数诱辱畅鹅添整粉捧番
  • B．PCR反应过程中荧光信号在指数增长阶段后期对应的循环次数富女获脾乃
  • C．PCR反应过程中荧光信号进入线性增长阶段所对应的循环次数威逮揉级
  • D．PCR反应过程中荧光信号进入稳定增长阶段所对应的循环次数情哄卷悲
  • E．PCR反应过程中荧光信号在基线期对应的循环次数纸应鼻尤颠尽
  • F．PCR反应过程中荧光信号进入平台期所对应的循环次数要涉冰干

• 荧光定量PCR的引物和探针对反应体系有重要影响。
  提示：荧光定量PCR的引物应具有以下哪些特点

  • A．引物的最适长度为20~40bp弟搜脉
  • B．G+C含量为20%~80%，45%~55%为最佳返晌猛
  • C．采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR，PCR引物不能形成明显的引物二聚体哲梳碰堂召浮
  • D．TaqMan探针荧光定量PCR引物的Tm值应在58~60℃唤秋召此
  • E．同一对引物的Tm值相差不超过4~5℃糖阔撤设也
  • F．引物3’端最后5个核苷酸应只有1~2个G/C绘室许甚模咏喝

• PCR技术在疾病的诊断、治疗监测和预后判断等方面应用广泛。
  提示：对遗传病进行基因诊断，采用PCR技术可检测相关基因的

  • A．点突变戏芳庸晕沈岔泰
  • B．嵌合体质缎
  • C．缺失突变叔棉斯
  • D．插入突变尼俯卫弄土几袖
  • E．染色体非整倍体售敲与
  • F．表达量异常旁宋畅

• 巢式PCR在临床检测中应用广泛。
  提示：巢式PCR最主要的缺点是

  • A．耗时长准娘
  • B．易污染昆莲毙渣
  • C．灵敏度低绝葱县亚隐即桐
  • D．特异性差抄怎签蹦莫译
  • E．不能定量庄边沉馆响
  • F．繁琐拼虽盼

• PCR引物设计是实验成败的关键环节。
  提示：PCR引物设计的原则包括

  • A．每条引物长度通常为18~25个核苷酸劝笑
  • B．引物3’端的第1、2个碱基必须与模板严格配对坟霜宴衡一复讯
  • C．引物3’端可加修饰成分，如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等闲禁从硬武拉寨
  • D．引物5’端可加修饰成分，如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等枕薄霜清
  • E．两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度亦尖项南黑缝华绢冶
  • F．引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区轨听需

• 巢式PCR在临床检测中应用广泛。
  提示：巢式PCR的优点包括

  • A．特异性降低蹈圈逐催战
  • B．特异性高色孩欠
  • C．适合扩增模板含量较低的样本铅等涂罩停三和从方
  • D．适合扩增模板含量高的样本基届寺吴
  • E．灵敏度低俭伍季蛙回宵妙
  • F．灵敏度大大提高近桑昼后蛇肢掉乏

• 可用来检测PCR扩增产物的技术包括

  • A．RFLP肆讽寄禁
  • B．SSCP艇晨祥新
  • C．PAGE电泳绢竞设艳粱叮愧魂留
  • D．Western blotting茅袍评烦暮陆
  • E．Sequencing粉炮圣穷

• 常用的荧光标记探针有

  • A．水解探针洪益壁灶兄堵
  • B．杂交探针故退冒星活蓝搞
  • C．分子信标帆饰吓借脂桂
  • D．MGB探针杯泊
  • E．TaqMan探针朱衬什东菜

• Taq DNA聚合酶具有以下特点

  • A．很高的热稳定性下哀沾购苹宵
  • B．5’ → 3’DNA聚合酶活性河怨别赤械刑处
  • C．5’ → 3’核酸外切酶活性弱掠口印挑俱舞陷鲁
  • D．3’ →5’核酸外切酶活性骑醉隔胜先盖弃肾
  • E．反转录酶活性桑宰宣筛