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• 巢式PCR在临床检测中应用广泛。
  提示：巢式PCR的检测原理为

  • A．采用两对引物（外引物和内引物）对靶基因进行扩增，先用内引物扩增出目的基因的较大片段，然后用外引物进行第二次扩增，扩增出目的基因的较小片段秘问怖
  • B．采用两对引物（外引物和内引物）对靶基因进行扩增，先用内引物扩增出目的基因的较小片段，然后用外引物进行第二次扩增，扩增出目的基因的较大片段七赤气竿誓脑跃晕师
  • C．采用两对引物（外引物和内引物）对靶基因进行扩增，先用外引物扩增出目的基因的较小片段，然后用内引物进行第二次扩增，扩增出目的基因的较大片段统棚弃除县千
  • D．采用两对引物（外引物和内引物）对靶基因进行扩增，先用外引物扩增出目的基因的较大片段，然后用内引物进行第二次扩增，扩增出目的基因的较小片段膀群率
  • E．同时采用两对引物（外引物和内引物）对靶基因进行扩增田僚丧倾摘庸永荷
  • F．同时采用三对引物（外引物1、2和内引物）对靶基因进行扩增潜瞎汁

• 荧光定量PCR的引物和探针对反应体系有重要影响。
  提示：荧光定量PCR的引物应具有以下哪些特点

  • A．引物的最适长度为20~40bp先旦症鹊蠢足
  • B．G+C含量为20%~80%，45%~55%为最佳穿孩磨让友子
  • C．采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR，PCR引物不能形成明显的引物二聚体识谈李俊犯
  • D．TaqMan探针荧光定量PCR引物的Tm值应在58~60℃蚂屯开核丹状
  • E．同一对引物的Tm值相差不超过4~5℃隔送
  • F．引物3’端最后5个核苷酸应只有1~2个G/C披吼奶高队槽例略

• 变性、退火、延伸的温度、时间和循环数对于PCR扩增很重要。
  提示：PCR反应中常用的延伸温度为

  • A．60℃虹步仔哨只谜誉披
  • B．65℃镇纱
  • C．68℃氧败
  • D．70℃暴顾芦复零巧袜钓挡
  • E．72℃蜓卵
  • F．75℃丙筛雅旨

• 荧光定量PCR是最常用于临床的靶核酸扩增技术。
  提示：常用的荧光标记探针包括

  • A．水解探针入防昂泽狠邪录掘橡
  • B．cDNA探针线钳浅常容
  • C．杂交探针击貌勉
  • D．分子信标歪限
  • E．RNA探针馒常肾肠恐
  • F．MGB探针较告公军非杀峰掏厌

• 荧光定量PCR可对起始模板数进行定量。
  提示：常用的定量方法包括

  • A．外标法距生颠协片驼
  • B．终点法逝毯誓令文梦
  • C．两点法猴朗
  • D．速率法亡留称
  • E．内标法倒姜卸随毁
  • F．动力学方法胞议谊任狼司

• 在PCR技术的基础上衍生出了众多的基因扩增技术，其中反转录PCR技术应用广泛。
  提示：反转录PCR的检测对象是

  • A．双链DNA中链轮英
  • B．RNA深扔度煮沈颤疏
  • C．cDNA役屠未绵怪毒
  • D．单链DNA猾惠敞程
  • E．蛋白质旱粒干
  • F．多肽配将目贡基柜丛稠横

• PCR引物设计是实验成败的关键环节。
  提示：PCR引物设计的原则包括

  • A．每条引物长度通常为18~25个核苷酸连好峡蛾史劣怜砌众
  • B．引物3’端的第1、2个碱基必须与模板严格配对难赢
  • C．引物3’端可加修饰成分，如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等掀舍罗熟纵煮辩膛妹
  • D．引物5’端可加修饰成分，如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等悲椅何茎均法蜻火
  • E．两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度茅心
  • F．引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区棵脑叠

• 荧光定量PCR可对起始模板数进行定量。
  提示：循环阈值与起始拷贝数的对数

  • A．呈正比例线性关系铸娃友获衡锋称狼翼
  • B．呈反比例线性关系鹿恩拆用刚岗罪
  • C．无关系纪御椅舒燕
  • D．互为相反数亩喝垃留
  • E．呈曲线相关关系丑右盘青牢边档近
  • F．呈不完全相关关系证择林

• PCR技术可用于遗传病的诊断，珠蛋白生成障碍性贫血是常见的常染色体隐性遗传病。
  提示：最常用于检测α-珠蛋白生成障碍性贫血基因缺失的方法是

  • A．PCR丛桂死重
  • B．PCR-RFLP忽盆橘色情测失裤烤
  • C．多重gap-PCR舰廉慌烤衡捏雹尚拐
  • D．PCR-SSCP挨操史川蜘针功朝翅
  • E．RT-PCR闲席岗
  • F．不对称PCR挎忘吞帅优

• 根据研究对象和目的的不同，可采用不同方法检测PCR扩增产物。
  提示：常用的检测PCR扩增产物大小的方法是

  • A．琼脂糖凝胶电泳铃铸挠宣贤贵蹲嗽风
  • B．核酸杂交颈钓宇滚守寻
  • C．聚丙烯酰胺凝胶电泳复汪
  • D．基因芯片球叮孔掌燥离穴
  • E．核酸序列分析蔽救歼科磨氧
  • F．荧光定量PCR煌萄梦斧乖