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• 已知多瘤病毒的一段高度保守序列（5’→3’）如下，下划线为引物退火区域。3001 ATTTTCTCAG GTAGGCCTTT GGTCTAAAAT CTATCTGCCT TACAAATCTG 3051 GCCTGTAAAG TTCTAGGCAC TGAATATTCA TTCATGGTTA CAATTCCAGG 3101 TGGAAACACC TGTGTTCTTT TGTTTTGGTG TTTTCTCTCT AAATTAACTT 3151 TTACACTTCC ATCTAAGTAA TCTCTTAAGC AATCAAGGTT GCTTATGCCA 3201 TGCCCTGAAG GTAAATCCCT TGACTCTGCA CCAGTGCCTT TTACATCCTC 3251 AAATACAACC ATAAACTGAT CTATACCCAC TCCTAATTCA AAGTTTAATC 3301 TTTCTAATGG CATATTAACA TTTAATGACT TTCCCCCACA GAGATCAAGT 3351 AAAGCTGCAG CTAAAGTAGT TTTGCCACTG TCTATTGGCC CCTTGAATAG 3401 CCAGTACCTT TTTTTTGGAA TGTTTAATAC AATGCATTTT AGAAAGTCAT
  提示：为了扩增特异的多瘤病毒核酸，引物对的序列应为

  • A．5’-ATTTTCTCAG GTAGGCCTTT-3’和3’-AATGCATTTT AGAAAGTCAT-5’苗课秘电截龄
  • B．5’-TAAAAGAGTC CATCCGGAAA-3’和3’-TTACGTAAAA TCTTTCAGTA-5’亮唐
  • C．5’-TAAAAGAGTC CATCCGGAAA-3’和3’-AATGCATTTT AGAAAGTCAT-5’蚊餐逃奔
  • D．5’-ATTTTCTCAG GTAGGCCTTT-3’和3’ -TTACGTAAAA TCTTTCAGTA-5’围隆
  • E．5’-TAAAAGAGTC CATCCGGAAA-3’和5’-TTACGTAAAA TCTTTCAGTA-3’嗓盘纸
  • F．5’-ATTTTCTCAG GTAGGCCTTT-3’和5’-AATGCATTTT AGAAAGTCAT-3’舞杨劲偷

• 耐热DNA聚合酶是影响PCR反应的重要因素。
  提示：最常用的DNA聚合酶是

  • A．Tth DNA聚合酶心待战
  • B．Taq DNA聚合酶闪盟兼率震呀
  • C．Vent DNA聚合酶溜盐涝
  • D．Pfu DNA聚合酶魔拼杜更嫌
  • E．Kornberg酶吴标
  • F．DNA polⅡ邀急

• PCR反应的缓冲液为DNA聚合酶提供最适反应条件。
  提示：缓冲液中Mg2+浓度对于PCR反应至关重要。Mg2+浓度过低会

  • A．提高DNA聚合酶活性暖斜
  • B．降低DNA聚合酶活性路啦份置难
  • C．使DNA聚合酶催化非特异性扩增棚抚愤率崭黎欠屡
  • D．使DNA聚合酶催化特异性扩增顽去羊
  • E．提高PCR产物量浸振番傻
  • F．降低PCR产物量挥甜镰

• 在PCR技术的基础上衍生出了众多的基因扩增技术，其中反转录PCR技术应用广泛。
  提示：反转录PCR的用途包括

  • A．检测基因突变饶欢眨迫
  • B．用于cDNA克隆爸灾咱锁浇脸鲁
  • C．检测DNA病毒励科茫
  • D．合成cDNA探针荷浪
  • E．检测RNA病毒宁张
  • F．分析基因表达盯危误泛稼缸估尝忌

• 变性、退火、延伸的温度、时间和循环数对于PCR扩增很重要。
  提示：PCR反应中常用的延伸温度为

  • A．60℃耳塘榆高铜柴株
  • B．65℃甘惹航口榜奸战贝
  • C．68℃喉唐剃则锤
  • D．70℃路冶凯驴
  • E．72℃煮酸聪
  • F．75℃瞒烤

• 在PCR技术的基础上衍生出了众多的基因扩增技术，其中反转录PCR技术应用广泛。
  提示：反转录引物可用

  • A．以随之进行的PCR扩增所需的上游引物为反转录引物剑练
  • B．以随之进行的PCR扩增所需的下游引物为反转录引物靠慢纠熟气胖认
  • C．以oligo(dG)为反转录引物含顶院
  • D．以oligo(dA)为反转录引物牛默违
  • E．以oligo(dT)为反转录引物支俘遵晌
  • F．以人工合成的随机序列六核苷酸混合物为反转录引物寒盗

• PCR反应的缓冲液为DNA聚合酶提供最适反应条件。
  提示：PCR反应常用的缓冲体系为

  • A．PBS跌茅狠举避丸
  • B．柠檬酸绢挤
  • C．碳酸路哲稀顶诸
  • D．Tris-HCl谎坚论逝浙姓
  • E．醋酸安膀鹰毯
  • F．巴比妥酸加逃时又之

• PCR引物设计是实验成败的关键环节。
  提示：引物的Tm值决定PCR扩增中的

  • A．变性温度蒜晋偏弊旱
  • B．淬火温度谈趴
  • C．退火温度描未横剩箭甘劳仍
  • D．延伸温度承亮虹妇以争妇量
  • E．熔解温度欲苗她串
  • F．解链温度沙之朱拖肆络掩

• 多重PCR具有以下哪些特点

  • A．可同时扩增出多个核酸片段晶印再必龙
  • B．可扩增同一靶基因的多个不同序列浓铃园邀南钉访瓜
  • C．各对引物间的扩增效率差别大稻意
  • D．可扩增多个不同的靶基因貌估宏秤僚凶
  • E．高效、经济、简便江透馒训等桑渐茄蹄

• 多重PCR在一次反应中加入两对或两对以上引物进行扩增，对同一靶基因的多个不同序列或多个不同的靶基因进行扩增。
  提示：多重PCR应满足以下条件

  • A．探针法多重荧光定量PCR各扩增产物片段的标记应相同，以便检测扩增产物醉春拒盐户
  • B．探针法多重荧光定量PCR各扩增产物片段的标记应不同，以便检测扩增产物舒种屯引僻纹塔纱狂
  • C．将反应条件不同的引物组合在一起，使反应条件尽量适合所有扩增片段帽匹笑班谣紧蚀
  • D．将反应条件接近的引物组合在一起，使反应条件尽量适合所有扩增片段幕巧扬
  • E．设计不同的引物，使同一反应中不同扩增产物片段的大小相同，以便检测时能用电泳技术将产物区别开来喜铁眯蠢狗捞柜馅亭
  • F．设计不同的引物，使同一反应中不同扩增产物片段的大小不同，以便检测时能用电泳技术将不同的产物区别开来醋霞瑞智请严